当马耳他人屡遭北非海盗袭击和不断骚扰之际，罗得岛上的圣约翰骑士团也正受到奥斯曼土耳其人越来越重的压力。15世纪后半期，土耳其人多次进攻都被圣约翰骑士团打退。但是，到1522年，经过一场长时间的相互进攻后，骑士团最终被迫放弃罗得岛。从地中海东部这座精心构筑的要塞中撤走。他们被迫向西转移，为寻找新的基地不得不长期奔波，费尽心机。随着岁月的消逝，骑士团实力逐渐削弱。团长意识到唯有迅速取得新的基地才能避免骑士团彻底垮台。查理五世皇帝提出有条件地把马耳他划给骑士团驻守。于是骑士团派出一个委员会到岛上察看，提出了报告：马耳他仅有的一点防御工事都已年久失修，岛上每年生产的粮食只能维持几个月，必须从西西里进口大量粮食。骑士团由于处境不见好转，最后在1530年春，圣约翰骑士团不得不把马耳他列岛连同的黎波里要塞一起作为皇帝赐予的领地接受下来。封建臣属通常应尽种种义务，而他们只每年进贡一头猎鹰，其他全部豁免。查理五世皇帝开出的条件则是：今后如果骑士团撤走，马耳他列岛未经查理五世或其继承人同意，不得擅自处理。骑士团舰队司令一职此后应由意大利人担任，以免这一关键性的职位落入法兰西入之手。在任命马耳他主教一事上，